柑橘脉突病毒基因组全长cDNA克隆及其侵染性鉴定

【目的】构建柑橘脉突病毒（citrus vein enation virus,CVEV）侵染性克隆,为从分子水平解析其致病机理打下基础。【方法】利用SMARTer^? RACE(rapid amplification of cDNA ends)试剂盒对CVEV的5′序列进行RACE,并依据序列分析结果及CVEV分离株VE-1保守序列,设计CVEV基因组全长cDNA扩增引物。以CVEV毒源植株的总RNA为模板,通过EV25-F/EV5983-R引物扩增CVEV基因组全长cDNA。利用In-Fusion重组连接线性化pXT1和CVEV全长cDNA。通过菌液PCR及测序分析鉴定CVEV基因组全长cDNA克隆。通过农杆菌介导的真空浸润接种摩洛哥酸橙（Citrus aurantium）、邓肯葡萄柚（C. paradisi）、尤力克柠檬（C.limon）、枳柚（C. paradisi×Poncirus trifoliata)、Rusk枳橙（P. trifoliata×C. sinensis）、枣阳小叶枳(P. trifoliata),进一步通过RT-PCR检测、症状观察鉴定所构建CVEV全长cDNA克隆的侵染性。【结果】建立了CVEV的基因组全长RT-PCR扩增体系,获得基于双元载体pXT1的CVEV基因组全长cDNA克隆10个。随机选取的6个全长cDNA克隆CVEV1901—CVEV1906的序列一致性为99.35%。其中,CVEV1901基因组全长5 983 nt,由5个开放阅读框、5′端207 nt和3′端198 nt的两个非翻译区、以及ORF2和ORF3之间122 nt的基因间隔区组成。序列分析结果显示,CVEV1901与浙江分离株XZG及四川SM分离株的序列一致性分别为99.98%和99.11%;与西班牙VE-1分离株、美国加州VE701分离株和日本IBK分离株基因组序列一致性在96.89%—98.61%;与同属中豌豆耳突花叶病毒（pea enation mosaic virus）和紫花苜蓿耳突病毒（alfalfa enamovirus）的序列一致性约90%。通过农杆菌介导的真空浸润将CVEV1901接种至6个不同的柑橘品种,接种后120 d的RT-PCR检测结果表明摩洛哥酸橙、邓肯葡萄柚、尤力克柠檬、枳柚、Rusk枳橙和枣阳小叶枳阳性植株/接种植株（阳性率）分别为16/17（94.12%）、12/14（85.71%）、16/21（76.19%）、15/19（78.95%）、13/14（92.86%）和0/18（0）。其中,部分摩洛哥酸橙出现典型CVEV侵染症状,叶片侧脉和支脉产生耳状小突起,叶背有相应的凹陷;部分邓肯葡萄柚和尤力克柠檬出现叶片皱缩现象。【结论】建立了CVEV的基因组全长RT-PCR扩增体系,获得了CVEV基因组全长cDNA侵染性克隆,通过农杆菌介导的真空浸润接种可引起摩洛哥酸橙、邓肯葡萄柚和尤力克柠檬的CVEV侵染症状。     

土壤微生物生物地理学：国内进展与国际前沿

土壤微生物生物地理学是研究土壤中微生物空间分布格局及其随时间变化的一门科学,是土壤微生物学和微生物生态学等领域的研究前沿。近年来,尽管土壤微生物生物地理学研究取得了巨大进展,目前仍面临诸多难题与挑战。本文简要回顾了土壤微生物生物地理学的发展历程,重点介绍近年来我国在森林、草地和农田生态系统中土壤微生物生物地理学研究的主要进展。同时进一步阐述了目前土壤微生物生物地理学研究的国际前沿方向,包括微生物群落空间分布及其驱动机制、群落构建过程与共存网络、微生物地理分布与生态系统功能的关联以及预测微生物群落对全球变化的响应。最后,对土壤微生物生物地理学未来的研究方向进行了展望,强调了清晰的微生物物种定义、微生物群落的时间动态、多组学与合成生物学技术以及高精度的预测模型在土壤微生物生物地理学研究中的重要性。     

Low‐carbon evaluation of rural neighborhood: A case study of Yanhe Village,Hubei Province,China

Climate change has become a global issue influencing human survival and development while low‐carbon is the inevitable choice. As the world’s largest emitter of greenhouse gases, China has become an important force that influences the cooperation of climate change. China is a large agricultural country, and the rural carbon emissions have been gradually increasing. We consider rural neighborhood as an important space for the use of low‐carbon ideas to address climate change. There is no specific assessment system for a rural neighborhood. The studies of rural neighborhood low‐carbon mainly focus on the method of calculation carbon emissions. However, only quantifying rural carbon emissions is insufficient. In this paper, a low‐carbon evaluation indicator system has been proposed for rural neighborhood and Fuzzy Comprehensive Evaluation has been applied to get the low‐carbon degree. Considering the influence and feedback inside the indicator system, Analytic Network Process was applied to get the weights. Furthermore, a case study was carried out for the using of the proposed method in an eco‐village of China. Our practice has proved that the system is easy to operate in rural neighborhood.     

红花双列杂交后代羟基黄色素A含量的遗传效应分析

选用6个羟基红花黄色素A（HSYA）含量差异较大的亲本,采用双列杂交方法配制杂交组合,测定2015年和2016年2年亲本及其后代F₁和F₂红花中的HSYA含量。运用双子叶植物种子数量性状遗传模型和统计分析方法,分析胚、细胞质和母体植株3套遗传体系的基因效应和环境互作效应。结果发现：在HSYA含量的遗传体系中,母体遗传效应影响最大,胚效应次之,细胞质效应影响最小。3套遗传体系均表现出基因主效应大于环境互作效应。机误方差较大,说明HSYA含量还受环境机误或抽样误差的影响。亲本遗传效应分析表明,豫红花1号（P₁）做亲本表现稳定,有利于增加杂交后代HSYA含量,达到提高品质、改良品种的效果。胚显性方差和母体显性方差均达到极显著水平,表明同时存在种子杂种优势和母体杂种优势,而且其主效应基因不受环境影响。综合考虑遗传主效应、胚显性效应和母体显性效应,亲本组合（P₁×P₅）有利于提高后代杂交品种的HSYA含量。该研究结果可为后代材料在杂种优势利用中的亲本选择提供理论支持。     

施肥对春青稞干物质积累、分配及产量的影响

为研究施肥对青稞干物质积累、分配及产量的调节作用,以‘藏青27’、‘QTB13’和‘QTB25’为试验材料,比较分析不同施肥处理下干物质积累、分配及产量的变化规律。结果表明：增加施肥量促进青稞分蘖期—成熟期的干物质积累及开花期和成熟期干物质向营养器官和籽粒的分配,提高了花前营养器官贮藏同化物转运量及对籽粒贡献率,降低了花后同化物输入籽粒量对籽粒贡献率。‘QTB13’和‘QTB25’在F₂条件下,更有利于干物质积累及向营养器官和穗部的分配,花后同化物输入籽粒量最大,产量也最大。‘藏青27’在F₃条件下,更有利于干物质积累及向营养器官和穗部的分配,花后同化物输入籽粒量和对籽粒贡献率最大,产量也最大。说明合理施肥有利于青稞干物质积累分配及产量提高。     

Role of PERK pathway in morphine-induced myocardial protection of H9c2 cells

AIM: To explore whether morphine protects oxidative stress-damaged myocardial cells by inhibiting the PERK pathway to reduce endoplasmic reticulum stress and prevent mitochondrial permeability transition pore (mPTP) opening. METHODS: Rat myocardial H9c2 cells were cultured to establish an oxidative stress model, and then randomly divided into control group, H₂O₂ group, H₂O₂+morphine group, H₂O₂+morphine+PERK pathway inhibitor GSK2656157 group, morphine group and GSK2656157 group. Immunohistochemical method was used to detect the effects of morphine on expression of glucose-regulated protein (GRP) 78 and GRP94 induced by oxidative stress. The protein levels of PERK signaling pathway-related molecules were determined by Western blot. Confocal microscopy was used to observe the effects of morphine on mPTP opening and endoplasmic reticulum induced by oxidative stress. Cellular toxicity was detected by lactate dehydrogenase (LDH) kit and cell viability was measured by MTT assay. RESULTS: Compared with control group, GRP78 and GRP94 proteins in H₂O₂ group were strongly expressed, and the brown-yellow particles were significantly increased, but morphine significantly inhibited this process. Compared with control group, the phosphorylation of PERK was significantly reduced with GSK2656157 treatment at different concentrations, among which 2 μmol/L had the most significant effect (P < 0.05). Oxidative stress significantly increased the protein levels of GRP78, GRP94, p-PERK and CHOP, but significantly decreased p-GSK-3β level. These changes were inhibited by morphine, and the effects of morphine were further enhanced by GSK2656157 (P < 0.05). Compared with control group, oxidative stress significantly reduced the fluorescence intensity of mitochondrial TMRE and ER-Tracker Red. Morphine significantly inhibited this effect even when mitochondrial membrane potential was reduced, mPTP was open, and endoplasmic reticulum was damaged, while GSK2656157 further enhanced the effect of morphine (P < 0.05). Compared with control group, H₂O₂ significantly increased cellular toxicity and decreased the cell viability. Morphine inhibited this effect and GSK2656157 significantly enhanced the effect of morphine (P < 0.05). CONCLUSION: Morphine protects cardiac H9c2 cells under oxidative condition by inhibiting endoplasmic reticulum stress through PERK pathway and preventing the mPTP opening via GSK-3β inactivation.     

朱顶红幼嫩花梗胚性愈伤组织诱导和高效植株再生

为建立高效的朱顶红植株再生和种苗繁育技术体系，以幼嫩花梗为外植体开展胚性愈伤组织诱导和植株再生研究。对2,4-D和噻苯隆（TDZ）浓度、外植体发育时期及大小进行了筛选，结果表明：将切片厚度为1 mm的幼嫩花梗外植体置于添加0.5 mg ? L-1 TDZ 和2.0 mg ? L-1 2,4-D的MS固体培养基上培养8周，胚性愈伤组织诱导率最高，达85.3%。将胚性愈伤组织转移至相同的培养基上，每月继代1次，平均每月增殖10.6倍。在不含任何生长调节剂的MS培养基上，胚性愈伤组织的植株再生率达98.0%，平均每块愈伤组织可再生出12.3个小植株。经过36次（3年）继代培养后，胚性愈伤组织的增殖和植株再生效率没有显著变化。幼苗移栽至温室驯化，成活率达97.5%。再生植株移栽到田间，没有发现明显的表型变异。对随机选择的再生植株和母株进行简单序列重复区间（ISSR）扩增分析，证实再生植株没有发生DNA水平变异。     

新时代湖泊渔业可持续发展的实践与思考(下)

五、突出湖泊渔业的产业属性,不断提升一二三产融合发展质量水平新时代湖泊渔业发展必然以最小的一产规模,通过与二三产业的充分融合,实现最大的经济效益。长期以来,"依湖而居、以渔为生"的传统渔民,大多采取"守株待兔"的销售方式,既无力进行产业链延伸,也不会创建自主品牌。湖泊渔业产业素质较低,体量将会因一产大规模压缩而迅速萎缩,必须采取措施,促进湖泊渔业转型升级。     

亚精胺浸种对番茄种子萌发及幼苗高温抗性的影响

以番茄品种合作903为试验材料,设置0、0.1、0.2、0.4 mmol · L~(-1 )亚精胺(Spd)浸种10 h,研究不同浓度Spd浸种对番茄种子萌发、幼苗生长及高温抗性的影响。结果表明:不同浓度Spd浸种处理均能显著提高番茄种子的发芽指数和活力指数,幼苗地下部干质量和壮苗指数明显提高,其中0.2 mmol · L~(-1 )Spd浸种处理发芽最快,活力指数最高。Spd浸种处理降低了高温胁迫下番茄叶片的相对电解质渗透率、丙二醛(MDA)和H_2O_2含量,其中0.2 mmol · L~(-1 )Spd处理的相对电解质渗透率、MDA和H_2O_2含量最低;抗氧化酶(SOD、APX、DHAR)活性增加,并在0.2 mmol · L~(-1)时达到最大值。综上,0.2 mmol · L~(-1 )Spd浸种能有效促进番茄种子萌发和幼苗生长,提高番茄幼苗高温抗性。     

中国林产工业产业关联与波及效应分析——基于投入产出模型的国际比较

文中基于中国、美国、俄罗斯、印度、巴西、印度尼西亚6国2000—2014年投入产出数据，通过测算中间需求率、中间投入率、感应度系数和影响力系数，对林产工业产业关联与波及效应进行动态比较分析。研究结果表明:相较于其他国家，中国木材加工业、造纸业的中间产品型产业特征明显，对国民经济贡献程度较高，但同时也面临成为“瓶颈产业”的风险；中国家具制造业的最终需求型产业性质显著，受整体经济发展的拉动作用明显弱于其他国家。总体而言，中国林产工业对国民经济的推动作用整体上高于国民经济发展对其的拉动作用。需要重点提升木材加工业、家具制造业整体产业链竞争力，加大科研创新投入力度以提升产出效率，并进一步提高家具制造业整体产品的附加值。